今天給各位分享雞胚接種成功的標(biāo)準(zhǔn)的知識(shí),其中也會(huì)對(duì)雞胚接種的優(yōu)缺點(diǎn)進(jìn)行解釋,如果能碰巧解決你現(xiàn)在面臨的問題,別忘了關(guān)注本站,現(xiàn)在開始吧!
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雞胚接種時(shí)應(yīng)注意哪些事項(xiàng)?
1、孵化場(chǎng)的要求
孵化場(chǎng)須遠(yuǎn)離養(yǎng)殖場(chǎng),以便于切斷疾病傳播,有較好的空氣環(huán)境和優(yōu)質(zhì)的水源,足夠時(shí)間的紫外線照射殺菌。孵化場(chǎng)工作人員進(jìn)場(chǎng)前,須經(jīng)紫外線照射,淋浴更衣,然后經(jīng)消毒池入場(chǎng)。孵化器與孵化室,在孵化前和出雛后都必須經(jīng)過有效的滅菌消毒。
2、孵化前的準(zhǔn)備
孵化室的準(zhǔn)備:孵化室應(yīng)嚴(yán)密,保溫性能良好,同時(shí)具有良好的通風(fēng)設(shè)備以保證室內(nèi)空氣新鮮。在孵化前對(duì)孵化室進(jìn)行必要的消毒工作,如:紫外線持續(xù)照射3~5h。
孵化器的準(zhǔn)備:在孵化前,孵化器應(yīng)經(jīng)檢修、熏蒸、消毒后方可入孵。
種蛋的消毒:種蛋要用熏蒸消毒法,每立方米高錳酸鉀1.5g,福爾馬林30ml,在27℃~30℃溫度下熏蒸20min,熏蒸后將氣體排出。
擴(kuò)展資料
孵育前的雞卵先用清水以布洗凈,再用干布擦干,放入孵卵器內(nèi)進(jìn)行孵育(37℃,相對(duì)濕度是45—60%),孵育三日后,雞卵每日翻動(dòng)1-2次。孵至第4日,用檢卵燈觀察雞胚發(fā)育情況,未受精卵,只見模糊的卵黃黑影,不見雞胚的形跡,這種雞卵應(yīng)淘汰。
活胚可看到清晰的血管和雞胚的暗影,比較大一些的可以看見胚動(dòng),隨后每日觀察一次,將胚動(dòng)呆滯或沒有運(yùn)動(dòng)的、血管昏暗模糊者,即可能是已死或?qū)⑺赖碾u胚,要隨時(shí)加以淘汰。生長(zhǎng)良好的蛋胚一直孵育到接種前,具體胚齡視所擬培養(yǎng)的病毒種類和接種途徑而定。
參考資料來源:百度百科-雞胚培養(yǎng)
參考資料來源:百度百科-雞胚
[img]接種病毒后雞胚狀態(tài)如何描述
接種病毒后雞胚狀態(tài)描述:
1、描述接種的具體時(shí)間。
2、描述接種后同一時(shí)段內(nèi)雞胚有沒有出現(xiàn)異常狀態(tài)。
3、描述狀態(tài)是正常發(fā)育,或者有沒有停止發(fā)育。
4、在描述外表有沒有出現(xiàn)病變,然后就描述完成了。
雞胚孵化和雞胚病毒接種有哪些關(guān)鍵因素和步驟
[實(shí)驗(yàn)材料]
白殼雞胚、孵化箱、1mL注射器、蛋架、新城疫工系和Ⅱ系弱毒苗等。
[實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備]
1.雞胚的選擇和孵化應(yīng)選健康無(wú)病雞群或SPF雞群的新鮮受精蛋。為便于照蛋觀察,以來航雞蛋或其他白殼蛋為好。用孵卵箱孵化,要特別注意溫度、濕度和翻蛋。孵化條件一般選擇相對(duì)濕度為60%,最低溫度36℃,一般37.5℃。每日翻蛋最少3次,開始可以將雞胚橫放,在接種前2d立放,大頭向上,注意雞胚位置,如胚胎偏在一邊易死亡。
孵化3~4d,可用照蛋器在暗室觀察。雞胚發(fā)育正常時(shí),可見清晰的血管及活的雞胚,血管及其主要分枝均明顯,呈鮮紅色,雞胚可以活動(dòng)。未受精和死胚胚體固定在一端不動(dòng),看不到血管或血管消散,應(yīng)剔除。雞胚的日齡根據(jù)接種途徑和接種材料而定,卵黃囊接種,用6~8日齡的雞胚;絨毛尿囊腔接種,用9~10日齡雞胚;絨毛尿囊膜接種,用9~13日齡的雞胚;血管注射,用12~13日齡雞胚;羊膜腔和腦內(nèi)注射,用10日齡雞胚。
2.接種前的準(zhǔn)備
病毒接種材料的處理懷疑污染細(xì)菌的液體材料,加抗生素(antibiotic)(青霉素100~500IU和鏈霉素100~500μg)置室溫中1h或冰箱12~24h高速離心取上清液,或經(jīng)濾器濾過除菌。如為患病動(dòng)物組織,應(yīng)剪碎、研磨、離心取上清液,必要時(shí)加抗生素(antibiotic)處理或?yàn)V過。
照蛋以鉛筆劃出氣室、胚胎的位置(圖12—1),若要作卵黃囊接種或血管注射,還要?jiǎng)澇鱿鄳?yīng)的部位。
打孔用碘酊在接種處的蛋殼上消毒,并在該處打孔。
[雞胚的接種]
雞胚接種一般用結(jié)核菌素注射器注射,注射完后均應(yīng)用熔化的石蠟將接種孔封閉。
1.絨毛尿囊腔內(nèi)注射取9~10日齡雞胚,用錐子在酒精燈火焰燒灼消毒后,在氣室頂端和氣室下沿?zé)o血管處各鉆一小孔,針頭從氣室下沿小孔處插入,深1.5cm,即已穿過了外殼膜且距胚胎有半指距離(圖12—2),注射量約O.1~O.2mL。注射后以石蠟封閉小孔,置孵育箱中直立孵育。
2.卵黃囊內(nèi)注射取6~8日齡雞胚,可從氣室頂側(cè)接種(針頭插入3~3.5cm),因胚胎及卵黃囊位置已定,也可從側(cè)面鉆孔,將針頭插入卵黃囊接種。側(cè)面接種不易傷及雞胚,但針頭拔出后部分接種液有時(shí)會(huì)外溢,需用酒精棉球擦去。其余同尿囊腔內(nèi)注射(圖12—3)。
3.絨毛尿囊膜接種
人工氣室法(圖12—4)取10~11日齡雞胚,先在照蛋燈下檢查雞胚發(fā)育狀況,劃出氣室位置,并選擇絨尿膜發(fā)育區(qū)作一“記號(hào)”。將胚蛋橫臥于蛋座上,絨尿膜發(fā)育區(qū)“記號(hào)”朝上。用碘酒消毒記號(hào)處及氣室中心部,在氣室中心部錐小孔。然后用錐子輕錐記號(hào)處蛋殼,約0.5mm深,使其卵殼穿孔而殼膜不破。用洗耳球吸去氣室部空氣的同時(shí),隨即因上面小孔進(jìn)入空氣而絨尿膜陷下形成一個(gè)人工氣室,天然氣室消失(如圖12—4)。接種時(shí)針頭與卵殼成直角。自上面小孔直刺破卵膜進(jìn)入人工氣室約3~5mm,注入0.1~0.2mL病料,正好在絨尿膜上。接種完畢用熔化石蠟封閉兩孔,人工氣室向上,橫臥于孵化箱中,逐日觀察。
直接接種法將雞胚直立于蛋座上,氣室向上,氣室區(qū)中央消毒打孔,用針頭刺破殼膜,接種時(shí)針頭先刺人卵殼約0.5cm,將病料滴在氣室內(nèi)的殼膜上(0.1~O.2mL),再繼續(xù)刺入約1.0~1.5cm(圖12—5),拔出針頭使病料液即慢慢滲透到氣室下面的絨尿膜上,然后用石蠟封孔,放人孵化箱培養(yǎng)。本方法的原理為:殼膜脆,刺破后不能再閉合,而絨尿膜有彈性,當(dāng)針頭拔出后被刺破的小孔立即又閉
4.羊膜腔內(nèi)接種所用雞胚為10日齡,有兩種方法。
開窗法從氣室處去蛋殼開窗,從窗口用小鑷子剝開蛋膜,一手用平頭鑷子夾住羊膜腔并向上提,另一手注射0.05~0.1mL病料液人腔內(nèi),然后封閉人工窗,使蛋直立孵化,此法可靠,但胚胎易受傷而死,而且易污染。
盲刺法將雞胚放在燈光向上照射的蛋座上,將蛋轉(zhuǎn)動(dòng)使胚胎面向術(shù)者。在氣室頂部到邊緣的一半處打一孔,用40mm長(zhǎng)的針頭垂直插入,約深30ram以上。如已刺入羊膜腔,能使針頭撥動(dòng)胚即可注入病料液0.1~0.2mL,如針頭左右移動(dòng)時(shí)胚胎隨著移動(dòng),則針頭已刺人胚胎,這時(shí)應(yīng)將針頭稍稍提起后再注射(圖12—6)。拔出針頭后石蠟封閉小孔。置孵化箱中培養(yǎng)。
[接種后檢查]
接種后24h內(nèi)死亡的雞胚,系由于接種時(shí)雞胚受損或其他原因而死亡,應(yīng)該棄去,24h后,每天照蛋2次,如發(fā)現(xiàn)雞胚死亡立即放入冰箱,于一定時(shí)間內(nèi)不能致死的雞胚亦放入冰箱凍死。死亡的雞胚置冰箱中1~2h即可取出收取材料并檢查雞胚病變。
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